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案例库使用说明

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常用服务项目

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案例精解:糖尿病肾病方向
糖尿病肾病方向
研究思路
第一阶段实验分析1-A
实验分析1-B
实验分析1-C
第二阶段实验分析2-A
实验分析2-B
实验分析2-C
实验分析2-D
结论
糖尿病肾病方向


糖尿病肾病方向锐赛点评

典型文章:

XBP1S Mediates High Glucose-Induced Oxidative Stress and Extracellular Matrix Synthesis in Renal Mesangial Cell and Kidney of Diabetic Rats。


背景:

糖尿病肾病(diabetic nephropathyDN)是由于糖尿病糖代谢异常为主因所致的肾小球病变。它是糖尿病引起的严重和危害性最大的一种慢性并发症,是糖尿病患者的主要死亡原因之一。糖代谢异常所致的内质网压力(ER stress)被证明是诱发DN的一个重要原因。早期DN表现为肾小球基底膜变厚和肾小球肥大而影响肾小球的正常功能。糖代谢所致的高糖环境产生的过量ROS造成肾小球上皮细胞功能障碍和肾小球足细胞的凋亡。肾小球系膜细胞负责维持肾小球囊正常功能和结构,为毛细血管袢和肾小球过滤功能提供结构支持,而过量ROS环境刺激肾小球系膜细胞的增生和过量分泌ECM导致肾小球基底膜变厚和肾小球肥大。关于高糖环境产生ROS的原因,目前已经证明NADPH氧化酶的激活是一个主要的因素,然而,高糖介导的NADPH氧化酶的激活的机制还不清楚。XBP1是一个重要的ER stress传导蛋白。近来,XBP1DN中的变化引起了人们的关注,XBP1有两个异形体(XBP1UXBP1S),Liu Y等已经证明XBP1能够在ER stress条件下对细胞提供保护,但是这种生物功能是如何实现的我们还不清楚。因此,本项研究的主要目的是揭示XBP1在高糖诱导的肾小球细胞氧化压力中的功能。

糖尿病肾病是糖尿病引起的一种最严重的慢性并发症,是糖尿病患者的主要死亡原因之一。探究糖尿病肾病发生发展的关键机制,进而找到抑制病情发展的药物或者治疗方案是目前急需解决的问题。该项研究利用建立成功的体外高糖诱导的肾小球系膜细胞模型,研究XBP1基因对高糖和氧化压力下肾小球系膜细胞的保护机制具有一定临床研究价值,此也是该项研究的一个亮点。

研究思路


第一

验证高糖刺激对肾小球细胞的影响以及NADPH氧化酶的作用 

第二阶段

验证XBP1SHG诱导的MCs细胞氧化压力和病理变化的作用


锐赛点评

该项研究的实验推进共分为两个阶段。首先对体外高糖诱导的细胞模型进行摸索,通过相关病例表型因子和氧化压力水平的检测确认体外模拟的DN的肾小球模型的科学性和可行性。第二阶段在确认模型构建成功后研究XBP1基因对高糖诱导下的MCs细胞的保护作用。整个方案流程逻辑清晰,研究目的明确,操作性合理,结合目前研究基础引入多个创新点,具有一定的临床研究的价值。

第一阶段实验分析1-A
HG处理后XBP1S表达下调,XBP1U表达无显著变化锐赛点评

     


Figure 1. Effect of high glucose on the expression of XBP1S. A: diagram shows the formation of XBP1S from XBP1U mRNA, a 26 bp fragment(from 484 to 509) was deleted during splicing. B: electrophoresis of RT-PCR products indicates MCs expressed both XBP1U and XBP1S. C and D:Western blot and real time PCR result show the expression of XBP1S before and after high glucose treatment (mean 6 SEM, n = 5).E: Western blot result shows the expression of XBP1U before and after high glucose treatment for 48 h (mean 6 SEM, n = 6) *p,0.05 compared to NG; ***p,0.001 compared to NG

研究方案设计思路清晰。首先通过调整MCs状态,设计多次预实验摸索糖浓度,HG处理时间,用以确认细胞状态,最佳糖浓度和HG处理时间,确立体外模拟体内高糖应激的最佳模型。其次,通过特异性引物的巧妙设计,结合WB实验,确认了XBP1基因在高糖应激条件下的表达模式,明确后续重点关注XBP1S的研究思路。


实验分析1-B

HG处理后FNcollagen IV表达增高,而NADPH氧化酶抑制剂DPI能逆转这种HG诱导的现象。

锐赛点评

Figure 2. Effects of high glucose treatment on collagen IV and fibonectin. Western blot results show high glucose treatment increases collagen IV (A) and fibronectin (B) levels (mean 6 SEM, n = 6). DPI reverses high glucose-induced increase in collagen IV and fibronectin expressions(C) (mean 6 SEM, n = 5). *p,0.05 compared to NG; ***p,0.001 compared to NG. #p,0.05 compared with HG.

高糖处理后MCs胞外基质蛋白的分泌明显增高,应证了DN的相关病例表型,证明HG条件下肾小球系膜细胞的体外模型的科学性,同时DPI的实验数据证明了NADPH氧化酶参与了肾小球系膜细胞在ER stress条件下的细胞病理改变,并在此过程中发挥了重要作用。


实验分析1-C

HG处理后p47表达增高,胞内ROS浓度升高。而NADPH氧化酶抑制剂DPI能逆转这种HG诱导的现象。

锐赛点评

Figure 3. Effects of high glucose on ROS generation and p47phox expression. A and B: Observation of ROS generation by DHE fluorescent probe assay (mean 6 SEM, n = 7). C: Western blot analysis on p47phox expression (mean 6 SEM, n = 6). ***p,0.001 compared to NG; ###p,0.001compared to HG.

高糖处理后MCs胞内ROS浓度明显增高,同时p47表达增加。应证了DN的相关病例表型,证明HG条件下肾小球系膜细胞的体外模型的科学性

第二阶段实验分析2-A

XBP1 OE腺病毒感染MCs后靶基因过表达效果明显

锐赛点评

Figure 4. Identification of XBP1S expression after transfection of Ad-GFP or Ad-XBP1S. A: Observation of the cell under fluorescent microscope after transfection of Ad-GFP or Ad-XBP1S for 24 h. B: Western blot analysis on XBP1S protein level after Ad-GFP or Ad-XBP1S transfection for 48 h.

多次预实验结果显示MCs细胞比较敏感,对腺病毒纯度要求高。同时在HG诱导的模拟病理状态下,病毒纯度和感染量以及overexpression效果的平衡则尤为重要,最终实验显示感染效果非常好,过表达效果显著,同时对细胞状态的影响较小,满足了后续研究的需求。


实验分析2-B


XBP1过表达后,HG诱导的FNcollagenIV表达上调受到抑制,提示XBP1参与了HG诱导的MCs细胞应激过程,对HGMCs细胞的损伤有保护作用

锐赛点评

Figure 5. Western blot analysis on ECM expressions in thecultured MCs with or without Ad-XBP1S transfection for 48 h.A: Collagen IV; B: Fibronectin (mean 6 SEM, n = 5). *p,0.05 comparedto NG; #p,0.05 compared with HG.


XBP1抑制肾小球系膜细胞ECM分泌的效果显著,证明了XBP1HG诱导的肾小球系膜细胞损伤的保护作用。


实验分析2-C

XBP1过表达后,HG诱导的p47表达上调和ROS浓度升高受到抑制,提示XBP1参与了HG诱导的MCs细胞胞内氧化应激,对HGMCs细胞的损伤有保护作用

锐赛点评

Figure 6. Changes in p47 and ROS generation after transfection of Ad-GFP or Ad-XBP1S. A: Western blot analysis on p47phox levels in the cultured MCs before and after Ad-XBP1S transfection for 48 h (mean 6 SEM, n = 5). B: Observation of ROS generation by DHE fluorescent probe assay in the cultured MCs before and after Ad-XBP1S transfection for 48 h (mean 6 SEM, n = 8). *p,0.05 compared to NG; #p,0.05 compared with HG; ##p,0.01 compared to HG. C: Western blot analysis on collagen IV and fibronectin levels after transfection of Ad-XBP1S or Ad-XBP1S+xanthine and xanthine oxidase (X?XO) for 48 h in the presence of HG. **p,0.01 compared to Ad-GFP; #p,0.05 compared with Ad-XBP1S (mean 6 SEM, n = 5).

XBP1降低肾小球系膜细胞胞内ROS的水平,证明了XBP1HG诱导的肾小球系膜细胞损伤的保护作用。

实验分析2-D

XBP1敲减后, MCs细胞ECM分泌和p47表达均上调,同时ROS浓度升高,进一步证明了XBP1MCs细胞胞外基质分泌和胞内氧化水平的调控作用

锐赛点评

Figure 6. Changes in p47 and ROS generation after transfection of Ad-GFP or Ad-XBP1S. A: Western blot analysis on p47phox levels in the cultured MCs before and after Ad-XBP1S transfection for 48 h (mean 6 SEM, n = 5). B: Observation of ROS generation by DHE fluorescent probe assay in the cultured MCs before and after Ad-XBP1S transfection for 48 h (mean 6 SEM, n = 8). *p,0.05 compared to NG; #p,0.05 compared with HG; ##p,0.01 compared to HG. C: Western blot analysis on collagen IV and fibronectin levels after transfection of Ad-XBP1S or Ad-XBP1S+xanthine and xanthine oxidase (X?XO) for 48 h in the presence of HG. **p,0.01 compared to Ad-GFP; #p,0.05 compared with Ad-XBP1S (mean 6 SEM, n = 5).

为了进一步证明XBP1基因对MCs细胞的高糖损伤压力下的保护作用,设计者引入siRNA的技术,试图通过XBP1的沉默,实现反向证明XBP1基因的保护作用。siRNA本身是一项很成熟的技术,但是MCs细胞中XBP1基因的表达属于应激表达类型,正常状态下MCs细胞中XBP1基因的本底表达比较低,不适合进行siRNA靶点的筛选。设计者通过多次优化摸索和实验创新,筛选到敲减效果比较显著的靶点,利用该靶点达到了实验预期。此为该部分实验的难点和亮点。


结论
ABUIABAEGAAgweOZoAUotpX3qgQwqwI4_QE
       In conclusion, in the experiment, we provided the evidence that XBP1S pathway of ER stress was suppressed in HG-treated renal MCs and renal cortex of diabetic rats. The suppression of XBP1S was related the NADPH oxidase activity and HG-induce ROS overproduction and consequent ECM synthesis. How does the HG treatment influence XBP1S pathway and whether XBP1S pathway can be a target modulating HG-induced oxidative stress and renal damage need further investigations.

2014年部分案例
年份 客户单位 项目名(隐去客户关键信息)主要实验标签
2014复旦大学附属华山医院P***细胞GO****基因敲减稳转株建立稳转株
2014上海市仁济医院mirco-****过表达慢病毒载体构建及大量包装慢病毒、载体构建、
2014上海市东方医院A*-**-****基因过表达、A*-**-D***-****基因过表达、**腺病毒大包腺病毒
2014华东医院***血症大鼠模型的建立及相关指标检测细胞水平综合研究
2014东方医院大鼠C****基因的过表达腺病毒包装及大鼠Re***基因的干扰靶点筛选及腺病毒包装腺病毒
2014汕头大学医学院第一附属医院5个DNA样本的11个位点甲基化检测甲基化
2014温州市中心医院10例样本中G*基因启动子II区甲基化检测和G***基因表达检测和颅内动脉瘤破裂模型建qPCR、甲基化、
2014上海肿瘤医院人f****基因慢病毒感染筛选SKOV3细胞稳转株慢病毒、稳转株、
2014上海肿瘤医院九株细胞的细胞鉴定其他细胞实验
2014新乡医学院D***对神经母细胞瘤增殖和侵袭的影响迁移和侵袭
2014吉林大学*****-原人参二醇与Rap******联合应用于裸鼠体内抗肿瘤效果研究细胞水平综合研究
2014上海肿瘤医院f****基因干扰S****稳转株筛选稳转株
2014温州第二人民医院10例样本中G***基因启动子II区甲基化检测和G***基因表达检测qPCR、甲基化、
2014浙江大学水甘油通道蛋白**在卵巢癌细胞增值、侵袭转移中的作用及机制研究迁移和侵袭
2014浙江大学R***对A**/A****和A***/A****通路的调控作用和相关机制研究细胞水平综合研究
2014上海市第九人民医院10例正常人血液样本、20例病人组织样本检测BMP5、Wnt5a表达其他检测
2014瑞金医院小鼠PD***基因过表达慢病毒和干扰腺病毒包装服务慢病毒、腺病毒、
2014复旦大学附属华山医院低氧诱导后主动脉内皮细胞活性氧及相关基因表达检测细胞水平综合研究
2014上海交通大学医学院附属第三人民医院人****基因过表达慢病毒包装慢病毒
2014沈阳军区总医院ZB****基因过表达和干扰之后H****细胞凋亡水平检测细胞水平综合研究、细胞毒性
2014新华医院小鼠基因型鉴定及细胞样本本底表达检测qPCR
2014哈尔滨医科大学附属第三医院人LA*****基因功能研究细胞水平综合研究
2014成都军区总医院T****过表达和干扰慢病毒包装慢病毒
2014上海东方医院国自然基金撰写课题设计撰写
2014上海市新华医院水凝胶对成骨细胞增殖分化的影响细胞增殖、细胞水平综合研究、
2014复旦大学附属眼耳鼻喉医院人***细胞系紫外线照射后对细胞内氧化压力平衡的影响细胞水平综合研究
2014复旦大学附属中山医院*基因启动子载体构建载体构建
2014宁夏医科大学慢病毒载体构建及大量包装慢病毒、载体构建、
2014瑞金医院人Has-m*****野生型和突变型过表达载体构建载体构建
2014第九人民医院小鼠源per******基因慢病毒包装及感染小鼠脂肪间充质干细胞水平验证实验慢病毒
2014南通大学附属医院20个组织样本的ra*****基因组BSP甲基化检测甲基化
2014新华医院三组样本的ELISA检测其他检测
2014第二军医大学载体构建载体构建
2014新华医院小鼠基因型鉴定其他检测
2014徐州医学院20个DNA样本的G***启动子序列BSP甲基化检测甲基化
2014第二军医大学H****基因真核表达载体构建载体构建
2014上海同济大学to*****干扰腺病毒大包腺病毒
2014沈阳军区总医院confocal验证****蛋白细胞间转移confocal
2014上海市第六人民医院人microRNA****(has-***-***)基因过表达慢病毒包装慢病毒、RNA干扰、
2014复旦大学附属华山医院病理组织切片染色其他检测
2014上海交通大学医学院附属仁济医院视网膜、角膜组织**染色及冰冻切片其他检测
2014上海交通大学附属第九人民医院小鼠F****、小鼠F****点突变体(C**)的慢病毒大包及人**基因真核表达载体构建慢病毒、载体构建、
2014西安交通大学医学院5株食管癌细胞miR-***基因本底表达检测qPCR
2014同济大学附属东方医院(上海东方医院)1个腺病毒大扩腺病毒
2014上海仁济医院mirco-****-**过表达和抑制慢病毒感染后H***细胞的功能影响慢病毒
2014西南大学化合物对h****细胞细胞凋亡和周期的影响细胞增殖,细胞毒性
2014浙江大学附属第二医院人N****基因D****突变体和C***基因过表达慢病毒包装慢病毒
2014徐州医学院G***启动子相关区域活性功能研究荧光素酶
2014温州市中心医院10例样本中G*基因启动子II区甲基化检测和G**基因表达检测和颅内动脉瘤破裂模型建立qPCR、甲基化、
2014沈阳军区总医院h****细胞凋亡相关因子qPCR ar***检测细胞毒性
2014第二军医大学药学院大鼠P****基因过表达慢病毒包装慢病毒
2014温州医科大学附属第一医院大鼠AL****基因慢病毒包装慢病毒
2014哈尔滨医科大学大庆校区真核表达载体构建载体构建
2014山东省肿瘤医院高糖刺激对S****细胞的影响研究细胞水平综合研究
2014河北省人民医院T*****基因过表达载体构建载体构建
2014江苏省中医药研究院E***-***过表达稳转MIN6细胞构建稳转株
2014辽宁师范大学小鼠真皮成纤维细胞***和k******基因过表达后相关基因表达检测细胞水平综合研究
2014上海仁济医院G-***调控髓性白血病细胞细胞周期信号通路研究细胞增殖
2014华东师范大学PCR定点突变其他分子类、
2014复旦大学附属中山医院大鼠组织TUNEL染色其他检测
2014上海交通大学医学院附属仁济医院小鼠基因型鉴定及细胞样本本底表达检测qPCR
2014浙江工商大学一系列载体构建载体构建
2014上海仁济医院mir****调控髓性白血病细胞细胞周期信号通路研究细胞增殖
2014上海市东方医院小鼠mir*****、mirco-****、mirco-***过表达腺病毒大包腺病毒
2014福建省立医院胰腺图片分析其他检测
2014上海交通大学附属上海市第一人民医院双荧光素酶检测其他细胞实验荧光素酶
2014广州军区武汉总医院小鼠S****基因的过表达慢病毒大量包装慢病毒
2014四川大学华西医院华西科技园25例**大鼠心肌组织5个蛋白WB检测WB
2014汕头大学医学院第二附属医院8个样本两个蛋白western blot检测WB
2014复旦大学附属眼耳鼻喉科医院猪眼内皮细胞mir-***检测及功能研究细胞水平综合研究
2014长海医院Ghrelin及GHSR在膀胱癌细胞及组织中的表达检测细胞水平综合研究
2014西安交通大学医学院2株食管细胞转染/慢病毒感染摸索慢病毒
2014广西壮族自治区人民医院结肠癌与***糖尿病相关性研究细胞水平综合研究
2014西南大学化合物对肿瘤细胞毒性以及凋亡和周期检测细胞增殖、细胞毒性
2014上海肿瘤医院双荧光素酶载体构建载体构建、荧光素酶


2011-2013年部分案例
年份客户单位项目名(隐去客户关键信息)主要实验标签
2013第二军医大学大鼠主动脉平滑肌细胞中干扰****和****基因腺病毒包装腺病毒
2013浙江省农科院猪M****基因RNAi筛选及慢病毒包装,改为腺病毒慢病毒、腺病毒、RNA干扰、
2013上海市长征医院消痰散结方对****增加下SGC****细胞、人淋巴管内皮细胞、血管内皮细胞的影响细胞水平综合研究
2013瑞金医院4个样本中25个基因的表达检测以及***蛋白的WB检测WB
2013四川大学华西医院人LI***基因过表达慢病毒和干扰慢病毒包装慢病毒
2013复旦大学附属肿瘤医院人LSAM*****基因的慢病毒包装及稳转株构建慢病毒、稳转株、
2013南京市鼓楼医院小鼠N***、KI****、L****基因RNAi腺病毒大量包装,减少2个基因腺病毒、RNA干扰、
2013上海交通大学附属第一人民医院大鼠RB****基因的最佳干扰靶点筛选及腺病毒大包/大鼠No****基因包内段腺病毒大包腺病毒
2013广西医科大学人C***,C***,F**和F****基因293T过表达稳转株构建稳转株
2013广西医科大学人N***基因干扰慢病毒和过表达慢病毒包装以及H***和***稳转株构建慢病毒、稳转株、
2013哈尔滨医科大学附属第二医院***对脑平滑肌细胞的保护作用及机制研究细胞水平综合研究
2013复旦大学附属金山医院GO****基因在C***发展过程中的功能研究细胞水平综合研究
2013华东医院***血症大鼠模型的建立细胞水平综合研究
2013上海市第九人民医院人HI***基因干扰腺病毒包装和感染人牙髓细胞后敲减效率验证腺病毒
2013西南大学化合物细胞毒性检测细胞毒性
2013中国医学科学院基础医学研究所SG*****细胞在KN***作用下的transwell检测细胞迁移和侵袭能力迁移和侵袭
2013沈阳军区总医院不同质粒转染的*****细胞与M**细胞共培养后confocal检测confocal
2013解放军总医院第一附属医院人H***干扰慢病毒感染人脐静脉内皮细胞后对血管形成的影响慢病毒
2013长征医院小鼠 Fa****有效靶点慢病毒大量包装慢病毒
2013沈阳军区总医院质粒转染的*****细胞并与大鼠***共培养后confocal检测confocal
2013浙江理工大学Luc********基因慢病毒载体构建和包装慢病毒、载体构建、
2013上海市第九人民医院CCK-8检测三种处理细胞方式对细胞增殖的影响细胞增殖
2013新华医院人TW***基因 ***** P***-promoter载体构建载体构建
2013瑞金医院人UC***有效靶点无荧光干扰慢病毒包装慢病毒
2013上海市第九人民医院2个基因慢病毒感染筛选***细胞稳转株慢病毒、稳转株、
2013新疆维吾尔自治区人民医院30个****瘤组织中2个蛋白的免疫组化检测和*定量分析免疫组化
2013厦门大学附属第一医院人RA**,RA**,RA**真核表达载体构建载体构建
2013山东大学齐鲁儿童医院AB****真核表达载体转染后流式检测表面标其他检测
2013上海儿童医学中心10个人血样抽提的gDNA样本4个基因的qPCR检测qPCR
2013山西医科大学2个基因干扰慢病毒包装慢病毒
2013上海市第一人民医院2个基因荧光素酶报告基因载体构建载体构建、荧光素酶
2013哈尔滨医科大学附属第一医院3株肾癌细胞株tw****基因本底表达检测qPCR
2013上海市第一人民医院4个基因荧光素酶报告基因载体构建载体构建、荧光素酶
2013瑞金医院DL**细胞药物处理后细胞活力检测细胞增殖
2013沈阳军区总医院增加干扰评价及转染检测其他检测
2013复旦大学附属金山医院大鼠原代软骨细胞在不同血清浓度下****的表达丰度检测qPCR
2013潍坊医学院附属医院大鼠***基因过表达腺病毒包装服务腺病毒
2013哈尔滨医科大学小分子哌啶酮化合物抗肿瘤作用研究细胞水平综合研究
2013上海交通大学附属瑞金医院培美曲塞和厄洛替尼协同作用研究细胞水平综合研究
2013复旦大学附属中山医院小鼠AL***基因过表达腺病毒AD-m*****-I***-E***大量扩增腺病毒
2013长征医院9个血液样本中小鼠St****基因(Fa**** )一个位点的SNP检测SNP
2013上海市第九人民医院小鼠脑组织(皮层)3个蛋白WB预实验,6个蛋白的WB正式实验WB
2013中山大学孙逸仙纪念医院3个DNA样本2个位段的BSP甲基化检测甲基化
2013湖南师范大学小鼠D***基因过表达/干扰慢病毒包装和稳转株构建慢病毒、稳转株、
2013上海市第十人民医院C***过表达及RNA干扰慢病毒感染人骨肉瘤细胞后WB检测凋亡通路蛋白/抗体慢病毒、WB、RNA干扰、细胞毒性
2013哈尔滨医科大学附属第三医院LA*****基因沉默对宫颈癌H***细胞生物学及血管生成的体外研究细胞水平综合研究
2013瑞金医院人Has-******慢病毒包装及稳定细胞株制备慢病毒
2013复旦大学附属肿瘤医院人*****基因慢病毒感染筛选A****和S****细胞稳转株,增加qPCR检测慢病毒、稳转株、
2013徐州医学院G***启动子相关区域活性功能研究荧光素酶
2013南京中医药大学中药作用下,人肝癌细胞H****的细胞活力的检测细胞增殖
2013沈阳军区总医院转染 WB 载体构建WB、载体构建、
2013上海市第一人民医院2个目的片段荧光素酶载体转染H****荧光素酶报告基因检测荧光素酶
2013复旦大学附属眼耳鼻喉医院人晶状体细胞系紫外线照射后细胞功能检测细胞水平综合研究
2013第二军医大学过表达k*****腺病毒大量包装腺病毒
2013上海交通大学附属第九人民医院人CD**干扰靶点设计、靶点慢病毒小包和有效靶点慢病毒大包慢病毒
2013上海市东方医院1个大包腺病毒腺病毒
2013中山医院腺病毒包装腺病毒
2013温州医学院附属第一医院人***基因干扰慢病毒包装慢病毒
2013新华医院荧光素酶报告基因检测荧光素酶
2013上海市东方医院sn***过表达及干扰腺病毒大包腺病毒
2013青岛市市立医院人HS***过表达慢病毒包装慢病毒
2013北京协和医院MA****基因干扰稳转卵巢癌细胞株构建和细胞功能实验细胞水平综合研究
2013上海市第一人民医院人GP****基因真核表达载体构建载体构建
2013长征医院腺病毒扩增腺病毒
2013沈阳军区总医院Bc****稳转M**细胞构建稳转株
2013郑州大学第一附属医院MY**敲减联合***抑制剂对神经母细胞瘤增殖和转移的影响细胞水平综合研究
2013上海市东方医院A*-**-D***-****、A*-**-D***-**及A****过表达腺病毒大包腺病毒
2013复旦大学附属肿瘤医院Fo***启动子构建P***-pro*****载体载体构建
2013瑞金医院HBV其他分子类
2013安医大药学院qPCR检测qPCR
2013上海市东方医院to*****基因过表达和干扰腺病毒大包腺病毒
2013沈阳军区总医院ZB****基因过表达载体构建载体构建
2013广西医科大学大鼠gh*****基因干扰慢病毒和过表达慢病毒包装和gh***基因过表达/干扰稳转AR**细胞构建慢病毒
2013大连医科大学附属第二医院人E****基因真核表达载体转染M****细胞其他细胞实验
2013第二军医大学小鼠CD36基因RNAi腺病毒大量包装,增加感染及qPCR检测腺病毒、RNA干扰、
2013上海交通大学附属第九人民医院小鼠F****、小鼠F****点突变体(C****)的慢病毒大包及人G***基因真核表达载体构建慢病毒、载体构建、
2013瑞金医院组织样本检测细胞水平综合研究
2013四川大学华西医院3个基因真核表达载体构建载体构建
2013浙江理工大学3个基因慢病毒包装慢病毒
2013山东大学齐鲁儿童医院人AB****基因3个点突变表达载体转染***细胞后WB检测蛋白表达WB
2013南通大学附属医院甲基化检测甲基化
2013广西壮族自治区人民医院I****/in*****信号轴结肠癌细胞行为影响的体外研究细胞水平综合研究
2013复旦大学附属华山医院MT****对胰岛素分泌的影响和在高糖下MTNR1B的保护作用细胞水平综合研究
2013昆山市第一人民医院U***在骨肉瘤细胞发病过程中的多种功能的研究细胞水平综合研究
2013上海市东方医院腺病毒大扩腺病毒
2013长征医院小鼠 Fa****野生型基因真核表达载体构建载体构建
2013复旦大学附属肿瘤医院干扰O****基因c****稳转细胞株稳转株
2013上海市东方医院大鼠原代心肌细胞腺病毒MOI值摸索腺病毒
2013青岛市市立医院****胞苷对食管癌细胞EC****生物学行为的影响细胞水平综合研究
2013南通大学附属医院8个组织样本的s*****基因组的BSP甲基化检测甲基化
2013复旦大学附属华山医院GR***与动脉粥样硬化研究细胞水平综合研究
2013上海市仁济医院G-***调控髓性白血病细胞细胞周期信号通路研究细胞增殖
2013郑州大学第一附属医院RE***稳定过表达*****细胞与SW****共培养细胞水平综合研究
2013上海市第一人民医院U****干扰慢病毒包装及H****细胞水平检测实验慢病毒
2013新华医院超分子水凝胶药物释放和毒性试验细胞毒性
2013文成县人民医院大鼠胰腺外分泌细胞AR***感染预实验和大鼠AL****基因表达检测qPCR
2013上海仁济医院人AC***干扰靶点设计、靶点慢病毒小包、靶点筛选、有效靶点慢病毒大包及筛选稳转株慢病毒、稳转株、
2013江西省妇幼保健院人beta-*******基因合成和真核表达载体pIR**-****-****-*******构建载体构建
2013郑州大学第一附属医院人N-C*******敲减后****细胞功能检测细胞水平综合研究
2013浙江大学附属第二医院人N****基因和人****基因过表达慢病毒包装慢病毒
2013浙江大学水甘油通道蛋白**在卵巢癌细胞增值、侵袭转移中的作用及机制研究迁移和侵袭
2013闽南师范学院碳纳米材料对小鼠细胞毒性检测细胞毒性
2013南京军区南京总医院小鼠dec*****基因(CL****)过表达腺病毒包装腺病毒
2013上海市第九人民医院小鼠脑组织(小脑)3个蛋白WB预实验,5个蛋白的WB正式实验WB
2013南京中医药大学药物体外抗氧化能力研究细胞水平综合研究
2013西南大学整体课题课题设计撰写
2013徐汇中心人民医院使用****预处理的两种肺癌细胞株的功能检测细胞水平综合研究
2013上海市肿瘤医院OT***基因点突变载体构建(D***/C***/H****)pCD*****-****-*****载体构建
2013上海市肿瘤医院OT***基因区域突变载体pCD****-****-*****构建载体构建
2013山东省千佛山医院***锯齿状腺瘤临床及病理学特征分析其他检测
2013上海肿瘤医院ca***和sk***阻断后测定周期细胞增殖
2013上海市东方医院tom****基因过表达Ad-**-****-**基因过表达腺病毒大包腺病毒
2013瑞金医院测试其他检测
2013上海市第九人民医院大鼠KLF5基因干扰靶点筛选及有效靶点腺病毒包装腺病毒
2013上海市第十人民医院基金撰写课题设计撰写
2013浙江大学附属第二医院人N****基因2个突变型过表达慢病毒包装慢病毒
2013上海交通大学附属第九人民医院小鼠FG***、小鼠FG***点突变体(C3***)的慢病毒对MC***细胞株的增殖影响慢病毒
2013天津大学支架材料细胞毒性检测细胞毒性
2013中国医学科学院放射医学研究所β-lac******过表达腺病毒包装腺病毒
2013江湾医院宫颈鳞状上皮癌变过程中的****,H****  al***,V***及A***的表达及与疾病发生qPCR、WB、
2013徐州医学院20个DNA样本的G***启动子序列BSP甲基化检测甲基化
2013上海市第九人民医院6个蛋白样本的WB检测WB
2013广西医科大学人****基因过表达稳转****和****基因干扰稳转HCT***细胞相关细胞功能检测细胞水平综合研究
2013复旦大学U***基因的功能研究及实验管理细胞水平综合研究
2013复旦大学附属中山医院子宫内膜癌细胞中C****的功能研究细胞水平综合研究
2013沈阳军区总医院ZB****基因过表达和干扰之后HU***细胞凋亡水平检测细胞水平综合研究、细胞毒性
2013温州医科大学人F****基因3个干扰载体构建载体构建
2013上海仁济医院mirco-****过表达慢病毒载体构建及大量包装慢病毒、载体构建、
2013第二军医大学药学院大鼠Pe***基因过表达慢病毒包装慢病毒
2013东方医院人JA****基因的过表达腺病毒包装腺病毒
2013东方医院Nu***基因的RNAi腺病毒包装腺病毒、RNA干扰、
2013湖南师范大学小鼠D***基因过表达G***稳转株增殖、凋亡和细胞周期检测稳转株、细胞增殖,细胞毒性
2013山东省肿瘤医院R****基因启动子核心区研究荧光素酶
2013瑞金医院联合药物处理结肠癌细胞株CCK8检测细胞增殖
2013上海中医药大学hp**基因载体构建及后续蛋白表达纯化载体构建
2013南京军区南京总医院人S***(Also known ******)基因过表达腺病毒小包腺病毒
2013复旦大学附属华山医院MS**基因rs109*****突变位点与前列腺癌的关系细胞水平综合研究
2013复旦大学附属妇产科医院VL**和***对雄性激素的影响细胞水平综合研究
2013复旦大学附属肿瘤医院增加慢病毒小包验证干扰效率慢病毒
2013复旦大学U***基因在**发展过程中的功能研究细胞水平综合研究
2013南通大学附属医院20个组织样本和5个细胞样本的ras****基因组BSP甲基化检测甲基化
2013辽宁师范大学*原代细胞基因沉默后相关基因检测细胞水平综合研究
2013第二军医大学小鼠Me****基因和*****基因融合表达真核载体构建载体构建
2012上海市闸北区市北医院P***合并***细胞及裸鼠移植瘤抑制效应研究细胞水平综合研究
2012山西医科大学TG****对几种结肠细胞中各项功能试验检测细胞水平综合研究
2012东方医院人sn***、to*****基因的RNAi及过表达腺病毒包装(4个)腺病毒、RNA干扰、
2012成都军区总医院hT****基因腺病毒包装及细胞水平检测腺病毒
2012上海市第一人民医院慢病毒感染人脐静脉HU***细胞水平检测实验慢病毒
2012中山大学附属第三医院人EG***基因干扰靶点筛选包装慢病毒并进行细胞水平检测慢病毒
2012同济大学附属口腔医学院人F****基因点突变对蛋白正常分泌加工的影响细胞水平综合研究
2012成都军区总医院整体科研课题细胞水平综合研究、课题设计撰写
2012上海市第一人民医院人UC***有效靶点干扰慢病毒包装慢病毒
2012辽宁师范大学干扰改为过表达慢病毒
2012上海市徐汇区中心医院L**抑制胃癌细胞株增殖能力、促进细胞凋亡和细胞周期阻滞研究细胞增殖,细胞毒性
2012长征医院小鼠F*野生型基因干扰筛选E*慢病毒包装,小鼠F*突变型基因过表达E*慢病毒包装,改为腺病毒慢病毒、腺病毒、
2012中国医科大学附属第一医院C***受体相关基因肝靶向性过表达腺病毒包装腺病毒
2012上海交通大学附属第六人民医院兔脑组织中T****、****以及、*****基因表达的检测与CO***蛋白和i***  蛋白WB检测WB
2012上海市农业生物基因中心水稻基因组BSP甲基化检测甲基化
2012中国医学科学院放射医学研究所验证Sur*****-promoter-***表达框架的启动效率。荧光素酶
2012南京市鼓楼医院小鼠CREB1基因的RNAi和过表达慢病毒制备慢病毒、RNA干扰、
2012南京市鼓楼医院小鼠Cr***基因的RNAi和过表达慢病毒制备慢病毒、RNA干扰、
2012瑞金医院人X***基因慢病毒感染MK***(****)和HCT***(****)制备稳定细胞株(混合株)慢病毒
2012同济大学附属同济医院VEGF-****、VE****腺病毒包装及大量扩增腺病毒
2012中山大学小鼠P****基因的RNAi筛选及干扰腺病毒包装腺病毒、RNA干扰、
2012解放军第264医院整体科研课题细胞水平综合研究、课题设计撰写
2012瑞金医院SNP(rs****)和(rs*******)生物学效应实验SNP
2011上海市东方医院Hi****基因(野生、点突变、区突变)过表达慢病毒包装及细胞感染实验慢病毒
2011江湾医院CR**基因在大鼠肝脏细胞中(缺氧刺激下)的功能及其机制研究细胞水平综合研究
2011上海药物研究所6个基因***细胞稳转株构建稳转株
2011复旦大学上海医学院大鼠Ad****基因RNAi慢病毒载体构建和包装慢病毒、载体构建、RNA干扰、
2011复旦大学附属妇产科医院大鼠**细胞加药刺激后检测实验细胞水平综合研究
2011安徽省芜湖市皖南医学院U***和U***基因RNAi靶点构建、筛选和腺病毒包装/U***和U***基因真核表达载体构建腺病毒、载体构建、RNA干扰、
2011上海市第五人民医院pE***-**-***-****-****表达载体构建及转染检测载体构建
2011安徽省芜湖市皖南医学院L***细胞在几种药物刺激后的功能和基因检测细胞水平综合研究
2011上海市第十人民医院人骨肉瘤细胞C***基因的过表达及RNA干扰研究RNA干扰
2011昆山市第一人民医院U***基因的功能研究及实验管理细胞水平综合研究
2011辽宁省大连医科大学附属第一医院Wnt信号活化对钙网织蛋白及细胞趋化性影响其他细胞实验
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